干細胞培養基是專門設計用于體外培養干細胞的營養基質,通過提供適宜的環境和關鍵成分,維持干細胞的自我更新能力、未分化狀態及多向分化潛能。
干細胞培養基的操作要點:
培養基配制
解凍與混合:無血清營養添加物需室溫或2-8℃解凍,避免反復凍融;按比例加入基礎培養基后混合均勻。
儲存條件:配制后的培養基2-8℃避光保存,穩定期通常為2-3周。
細胞培養操作
基質膠包被:貼壁培養需用基質膠預處理培養板,促進細胞粘附。
細胞接種與觀察:接種后置于37℃、5% CO?培養箱,定期觀察細胞形態及密度。
換液與傳代:每24小時換液一次,避免活性成分耗盡;傳代時控制消化時間,防止細胞損傷。
質量控制
無菌檢測:每批培養基需通過細菌、真菌、支原體、內毒素檢測。
性能驗證:通過干細胞生長曲線實驗,確認培養基能維持和擴增未分化干細胞。